電位測(cè)定法測(cè)定酶的催化活性:
pH 敏感的玻璃電極可以用于測(cè)定那些產(chǎn)生或消耗質(zhì)子的反應(yīng)。出于這個(gè)目的,利用反 滴定法保持pH 的恒定,所需要的酸或堿的消耗量就可以被測(cè)定。電極控制著自動(dòng)滴定器, 這個(gè)概念就是BUCHER 描述的pH-stat 技術(shù)。
一個(gè)典型的例子是脂肪酶(E.C.3.1.1.3)[9001-62-1]催化活性的測(cè)定。
某脂(甘油三酯) 被該酶水解,生產(chǎn)的脂肪酸被NaOH 在pH-stat 的模式下反滴定中和。 甘油三酯+H2O→甘油二酯+脂肪酸 橄欖油作為底物,和含有脂肪酶的稀釋樣品溶液混合溫育,混合物在恒定pH 下滴定。 紀(jì)錄器標(biāo)繪出了NaOH 的消耗量隨時(shí)間的變化曲線,所得到的斜率與酶的催化活性相關(guān)。
其 他的例子如木瓜蛋白酶(E.C.3.4.22.2)[9001-73-4]的測(cè)定和葡萄糖氧化酶(glucose oxidase, E.C.1.1.3.4)[9001-37-0]的測(cè)定。
電位測(cè)定法
PH的實(shí)用定義
電位滴定終點(diǎn)確定
電位測(cè)定法的依據(jù)是待測(cè)離子的活度與其電極電位之間的關(guān)系遵守能斯特方程.
電位分析法是利用物質(zhì)的電化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行分析的一大類分析方法.包括直接電位法和電位滴定法.
直接電位法是利用專用電極將被測(cè)離子的活度轉(zhuǎn)化為電極電位后加以測(cè)定,如用玻璃電極測(cè)定溶液中的氫離子活度,用氟離子選擇性電極測(cè)定溶液中的氟離子活度[1](見離子選擇性電極).
電位滴定法是利用指示電極電位的突躍來指示滴定終點(diǎn).
兩 種方法的區(qū)別在于:直接電位法只測(cè)定溶液中已經(jīng)存在的自由離子,不破壞溶液中的平衡關(guān)系;電位滴定法測(cè)定的是被測(cè)離子的總濃度.電位滴定法可直接用于有色 和混濁溶液的滴定.在酸堿滴定中,它可以滴定不適于用指示劑的弱酸.能滴定K小于 5×10-9的弱酸.在沉淀和氧化還原滴定中,因缺少指示劑,它應(yīng)用更為廣泛.電位滴定法可以進(jìn)行連續(xù)和自動(dòng)滴定.
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